Establishment of a simple and efficient platform for car-t cell generation and expansion: from lentiviral production to in vivo studies

ABSTRACT Introduction: Adoptive transfer of T cells expressing a CD19-specific chimeric antigen receptor (CAR) has shown impressive response rates for the treatment of CD19 + B-cell malignancies in numerous clinical trials. The CAR molecule, which recognizes cell-surface tumor-associated antigen independently of human leukocyte antigen (HLA), is composed by one or more signaling molecules to activate genetically modified T cells for killing, proliferation, and cytokine production. Objectives: In order to make this treatment available for a larger number of patients, we developed a simple and efficient platform to generate and expand CAR-T cells. Methods: Our approach is based on a lentiviral vector composed by a second-generation CAR that signals through a 41BB and CD3-ζ endodomain. Conclusions: In this work, we show a high-level production of the lentiviral vector, which was successfully used to generate CAR-T cells. The CAR-T cells produced were highly cytotoxic and specific against CD19+ cells in vitro and in vivo, being able to fully control disease progression in a xenograft B-cell lymphoma mouse model. Our work demonstrates the feasibility of producing CAR-T cells in an academic context and can serve as a paradigm for similar institutions. Nevertheless, the results presented may contribute favoring the translation of the research to the clinical practice.

Effects of hormone therapy on the endometrium in postmenopausal women: a one year randomized trial of low dose oral estradiol in association with a levonorgestrel-releasing intrauterine system or drospirenone / Efeitos da terapia hormonal no endométrio de mulheres na pós-menopausa: estudo clínico randomizado por um ano com estradiol oral em baixa dosagem em associação com sistema intrauterino com levonorgestrel ou drospirona

To compare the endometrial effects and uterine bleeding patterns associated with treatment using (1) levonorgestrel-releasing intrauterine system (LNG-IUS) and estradiol (1 mg/day, p.o.) or (2) orally administered drospirenone (2 mg/day) andestradiol (1 mg/day). METHODS: thirty-four patients (aged 52.53 ± 4.44 in the LNG-IUS group and 53.15 ± 4.018 in the DRSP group) were randomized. The severity of menopausal symptoms was evaluated using the Kupperman index every three months. Transvaginal ultrasound, hysteroscopy and histological evaluation were repeated after 12 months. During this period, patients kept menstrual calendars. All categorical variables were described as percentages. Variables were tested for normal distribution and Student's t test was applied for independent samples and ANOVA forrepeated measures when appropriate. Data were considered to be significant when p<0.05. RESULTS: slight vaginal bleeding was reported in the first month of treatment by 53.3 percent of patients from the LNG-IUS/estradiol group compared with 7.7 percent of patients from the drospirenone/estradiol group. There were no differences in endometrial thickness between the two groups throughout the study period. End-of-study histological findings showed atrophic endometrium in 53.3 percent of patients in the LNG-IUS/estradiol group compared with 76.9 percent of patients in the drospirenone/estradiol group. CONCLUSIONS: our results suggest good endometrial protection with both HT regimens...

Comparar os efeitos endometriais e no padrão de sangramento uterino de tratamento com (1) sistema intrauterine com levonorgestrel (SIU-LNG) e estradiol (1 mg/dia, v.o.) ou (2) associação oral de drospirenona (DRSP) (2 mg/dia) e estradiol (1 mg/dia). MÉTODOS: trinta e quatro pacientes (idade 52,53 ± 4,44 grupo SIU-LNG e 53,15 ± 4,018 grupo DRSP)foram randomizadas. A gravidade dos sintomas menopausais foi avaliado pelo índice de Kupperman a cada três meses. Ultrassom transvaginal, histeroscopia e avaliação histológica foram repetidos após 12 meses. Durante este período, as pacientes fizeram registros em calendários menstruais. Todas as variáveis categóricas foram descritas como porcentagens. Variáveis foram testadas para distribuição normal e teste t de Student para amostras independents e ANOVA para medidas repetidas foram utilizados quando apropriado. Significância estatística foi considerada para p<0.05. RESULTADOS: leve sangramento vaginal foi relatado no primeiro mês de tratamento por 53,3 por cento das pacientes do grupo SIU-LNG/estradiol vs. 7,7 por cento das pacientes do grupo drospirenona/estradiol. Não houve diferença na espessura endometrial entre os grupos durante o periodo do estudo. Os achados histológicos ao final do estudo motraram endométrio atrófico em 53,3 por cento das pacientes no grupo SIU-LNG/estradiol vs. 76,9 por cento das pacientes no grupo drospirenona/estradiol. CONCLUSÕES: nossos resultados sugerem boa proteção endometrial com ambos os tratamentos de terapia hormonal...

Perfuração de septo nasal em paciente com pioderma gangrenoso / Nasal septum perforation in patient with pyoderma gangrenosum

Introdução: A cocaína é extraída das folhas do arbusto da coca (Erythroxylon coca), podendo ser consumida de várias formas, mas o modo mais comum é pela aspiração da droga, sendo absorvida pela mucosa nasal, causando vasoconstricção, levando o seu uso crônico à perfuração de septo nasal. Pioderma gangrenoso é uma doença inflamatória rara, idiopática que se caracteriza pela presença de úlceras destrutivas principalmente em membros inferiores. Seu diagnóstico clínico é muitas vezes de exclusão. Objetivo: Descrever a raridade de associação entre Pioderma Gangrenoso e cocaína. Relato de Caso: E. A., 27 anos, com apresentação atípica de Pioderma Gangrenoso com perfurações de septo nasal e palato duro usuária de grande quantidade de cocaína, sendo necessário diferenciar qual patologia causou esse dano. Comentários Finais: Além da necessidade dessa diferenciação, apenas existem três casos relatados na literatura, envolvendo o Pioderma Gangrenoso complicado com perfuração de septo nasal em usuários de cocaína...

Introduction: The cocaine is obtained from the leaves of the coca (Erythroxylon coca). It can be used in many ways, but the most common is the drug inhalation. The Cocaine also causes vasoconstriction at nasal mucous membrane and its chronic use can cause necrosis and nasal septum perforation. Pyoderma gangrenosum is an uncommon idiopathic disease characterized by ulcerations, usually observed on the legs. Its diagnosis is most common an exclusion of others diseases. So far, there is no specific treatment based on evidence by randomized controlled trials. Objective: Describe the rare association between Pyoderma gangrenosum and cocaine. Case Report: E. A., 27-year-old woman with destruction of nasal septum and palate who has been using a big amount of cocaine, been necessary note the difference from which disease cause de damage. Final Comments: Also there are only three cases of Pyoderma gangrenosum complicated with nasal septum perforation in cocaine users...

Pseudocisto pancreático associado à doença hepática na gestação: relato de caso / Pancreatic pseudocyst associated with liver disorder in pregnancy: case report

As doenças hepáticas, de vias biliares e pancreáticas podem causar grande morbimortalidade materno-fetal. Nesses casos, o diagnóstico e o tratamento imediatos são essenciais para reverter esse processo e melhorar o prognóstico materno-fetal. Apresentamos um caso clínico de paciente primigesta de 17 anos que foi internada por disfunção hepática severa. Ela foi submetida a cesariana e a duas laparotomias subsequentes decorrentes de sangramento e evisceração. Posteriormente, a paciente apresentou pseudocisto pancreático com manejo conservador e boa evolução. Concluímos que o conhecimento das doenças hepáticas, de vias biliares e pancreáticas na gestação e suas complicações é fundamental para reduzir a morbimortalidade materno-fetal.

Pregnancy-associated liver, biliary and pancreatic disorders are conditions that can cause high maternal and fetal morbidity and mortality. In such cases, prompt diagnosis and immediate treatment are essential for the reversal of the underlying process and for maternal and fetal survival. We presented a clinical case of a 17-year-old primigravid woman hospitalized with severe liver dysfunction. She subsequently evolved to cesarean delivery and two laparotomies secondary to bleeding and evisceration. Afterwards, she presented with pancreatic pseudocyst. She was submitted to conservative management and had a good evolution. We concluded that the knowledge of the pregnancy-associated liver, biliary and pancreatic disorders and their complications is fundamental to reduce maternal and fetal morbidity and mortality.

O pacto dos indicadores da atençäo basica: um instrumento de monitoramento e avaliacao da gestao do SUS na Paraiba / The Basic Care Indicators Pact: a tool for monitoring and assessing SUS management in Paraiba

O Projeto para a construcao da Pacto da Atencao Basica na Paraiba constitui instrumento de monitoramento e avaliacao das acoes de servicos, tendo sido incorporado ao processo de trabalho da Secretaria de Estado da Saude (SES-PB) em meados de marco de 1999. Para dar legitimidade e concretude ao processo, a SES-PB compos um grupo de conducao e desenvolveu Oficinas regionais que resultaram na pactuacao de 36 indicadores de saude com os 223 municipios paraibanos